会计考友 发表于 2012-8-22 23:39:30

生化检验辅导:胆汁酸测定的方法学评价

  血清总胆汁酸的测定是肝疾病的一个敏感指标。目前推荐检测血清总胆汁酸的方法是循环酶法。酶学偶联测定方法第三代试剂原理,是血清中总胆汁酸在NAD+存在下,3α-HSD作用于3-α羟基生成中间产物3-酮类固醇,NAD+被还原为NADH。在黄素酶的存在下,NADH氧化为NAD+,而共存的NBT还原为甲潜衍生物。甲潜衍生物的生成量与血清中总胆汁酸含量成正比。第四、五代试剂原理,胆汁酸被3α羟基类固醇脱氢酶(3a-HSDH)及口-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型特异性的氧化,生成3酮类固醇及}硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型。此外,生成的3酮类固醇在3α羟基类固醇脱氢酶及β硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型存在下,生成胆汁酸及β烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型。以上依据循环酶而放大量的胆汁酸测定生成的β-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型的吸光度,计算血清中胆汁酸的量。第五代循环酶法有将血清中胆汁酸浓度放大的效果。
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