2012年报检员考试综合辅导：检疫性真菌病害-烟草霜霉病

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% b) z) T* G" f9 p0 v　　2012年报检员考试辅导：检疫性真菌病害-烟草霜霉病
　　烟草霜霉病 Tobacoo blue mold
　　分布与危害：1891年澳大利亚首先报道，后传入欧洲、非洲、美洲和亚洲，现广泛分布，中国尚未发现。
1 e$ ]' f, z! V- g　　苗床和田间均发病，蔓延速度极快，引起大量植株枯死，是烟草的毁灭性病害。1960年欧洲流行，法国和比利时烟草损失80～90%，1961年损失干烟叶100，000吨。
, i; F2 n( J9 W# ~  h　　寄主范围：专性侵染，寄主范围窄，主要侵染烟草，自然条件下，还可侵染番茄、辣椒、茄子和马铃薯等茄科植物，人工接种可侵染矮牵牛、酸浆和灯笼草等。
# C2 Y" t+ Q3 @1 G　　症状：
　　1.发病时期：主要在苗期，大田期也发生。
　　2.发病部位：主要为害叶片。
　　3.症状特点：因病原菌的生理型不同，受害部门也有差异，如美国流行的是美国生理型。主要危害幼苗，成株感染较少，不易感染茎部；欧洲流行提澳洲生理型，其危害特点是除危害烟草幼苗外，还能危害烟茎和成株。病叶表面和边缘表现淡黄色、黄绿色、暗绿色的病斑，病斑为圆形、近圆形、多角形或形状不规则。病害发展迅速时，病斑可相互连接起来，布满整个叶片，或没有明显的界限。病叶背面密生灰蓝色或灰褐色的霜霉层，干烟叶一般表现为灰白色或灰褐色，苗床上的病苗表现为灰蓝色。条件适宜时，叶表面也产生霜霉层，随着病斑的发展，逐渐变褐色，甚至深褐色，最后成为枯褐色。干烟叶上病斑表面有突起，老病斑边缘有一圈青褐色环，与马铃薯晚疫病症状相似。烤后的烟叶症状尚隐约可见；空气湿度大时，病斑更为明显。
　　4.烟草霜霉病与其他病害的症状区别：烟草霜霉病的病斑有时容易与烟草黑胫病叶部症状相混淆。因黑胫病叶部病斑圆形，表现青褐色大斑，呈水渍状，背面霉层稀少，毛短色白，与霜霉病仍有区别。另外，烟草霜霉病染病部位产生霜状霉层，不仔细观察与烟草白粉病产生的白色粉状霉层也易于混淆，但因霜霉病的霜状霉层大多局限于病叶背面，而白粉病的粉状霉层则在叶片的正反两面都产生，只要仔细观察亦不难区别。
　　病原菌：Peronospora hyoscyami de Bary f.sp. tabacina （Adam） Skalicky
　　异名 Peronospora tabacina D.B. Adam
　　Peronospora hyoscyami de Bary
% p+ O; v, h1 O$ ^7 i　　Peronospora nicotianae Speg
0 y6 k. r5 d7 k) z( a  E　　英文名称：blue mould of tobacco ；tobacco blue mould ；downy mildew ；angular tobacco leaf spot ；tobacco black fire ；tobacco wildfire
　　分类地位：Chromista藻物界（也称假菌界）、Oomycota， Oomycetes， Peronosporales， Peronosporaceae
　　病原菌形态特征：细胞内菌丝产生细胞内吸器，孢囊梗在叶片的下表面通过气孔口伸出，长450-750μm，二叉式分枝，基部分枝成锐角，上部呈直角，顶端弯曲，末端尖，上生孢子囊；孢子囊透明无色，柠檬形，大小16-28 ×13-17？m，每个孢子含 8-22 核；卵孢子黄褐色到红褐色，球形，大小 24-75 ？m， 周围光滑或粗糙的外膜，干燥时收缩成棱角状皱纹，在死亡叶片、叶柄和茎的叶肉中大量存在。
& Y. z: n0 l) Z* f& {2 o　　病原菌生物学特征：
　　1.在适宜湿度条件下，孢子囊生成的最低温度为1-2℃，最适宜温度为15-23 ℃ ，最高温度为30 ℃ ，而在最适温度条件下，孢子形成所需的最适湿度范围是叶面相对湿度97-100%.
　　2.孢子囊萌发的温度范围为：最低 l一2℃，最适为15-22℃，30℃有少量萌发，35℃萌发率为0.1%.
　　3.卵孢子有极强的抗逆性，经贮存4年后仍能存活；在80℃下烘烤4天，然后在35℃、RH50—60%条件下发酵，孢子仍有侵染能力。
　　4.致病性分化：本病菌的美国生理型和澳洲生理型致病性不同。澳洲生理型存在有3个生理小种。
$ B9 N- a+ V  C5 \" T* O　　传播途径：
3 ~( t, n, }) A# n  a　　1.气流传播：气流传播是烟霜霉病得以造成重大危害的主要途径，而孢囊孢子是进行气流传播的主要病原体，根据气流及温度、湿度条件，孢子在两小时之内，可传播200km最高可达1600km，由于孢子所具有的高度传播能力，在南欧和北非早春的气体孢子可直接成为初侵染的来源。
  S2 ]: p6 L: i" A　　2.卵孢子传播：在美国东南部烟区，存在于病土中的卵孢子和存在于病残烟组织中的越冬菌丝的旧苗床是翌年春季侵染来源，在加拿大甚至中欧和北欧，卵孢子也是翌年侵染的主要来源，Krober曾报告50个月的卵孢子仍可造成较低的侵染率，但田间发病则很稀少。在南欧，卵孢子在初侵染上的传播一直未能肯定。虽然如此，由于卵孢子所具有的特殊抗逆性，存在于烟株下部叶片的卵孢子，可能是病害远地传播的另一途径。
　　发病规律：
　　越冬：菌丝体在田间或温室的病株、自生烟苗、野生烟草上越冬；卵孢子能在病株残体和土壤中越冬。
　　发病条件：温度和湿度时影响病害发生和流行的主要因素，夜间温度10℃，白天21℃，有间歇小雨或结露时间长或叶面湿润，光照弱等有利于病害发生。
　　适生区域：中国大部分烟草种植区。
　　检验方法
　　1.症状检查：根据现行抽样规定，对每批烟叶按上、中、下三层以对角线抽取烟叶，来自烟霜霉病疫区的烟叶，每品种每批抽样总数应不少于5万张，每品种、各等级烟叶抽样总数应为1万至2万张。抽取的烟叶样品，应在杜绝污染的条件下适当回潮，使叶面舒张，然后在4x40W-5x40W白色荧光 灯照射下检查病斑，病斑淡褐黄色，常受叶脉所限，呈不规则圆形，易于透光，叶背面可见霜霉霉层，可以直接用立体显微镜（50x）观察孢梗及孢囊群体，也可在光学显微镜下鉴定病原。
' k- M( O3 z: r5 R　　2. 洗涤检验孢子囊：
　　3.组织透明法检验卵孢子：卵孢子大多聚生于叶脉附近，可剪取小块病斑组织（约0.5cm）滴加少许PH7磷酸缓冲液（0.02M）在-20C冻融过夜，然后用0.02MPBS（PH=7）匀浆，匀浆液经80um及90um双层筛过滤并清洗取集20um筛上物离心，检查沉淀液。也可在密闭条件下有高速粉碎机（10000rpm） 粉碎，再将粉碎后的叶组织用网目约80um的细目筛过后取筛下物，经乳酚油透明后检查。
; x% l; A4 q, }　　4.试植检查：为观察子叶或幼苗戡期的症状，可将种子用0.2%NaClO灭菌后，植入盛有2%琼脂培养基或任何用于植物水培的盐类培养基的密封玻皿内，每200ml 培养基平面可播养1000粒种子，在20C光照条件下培养，种子出苗后的2周内，观察烟种幼苗有无染病迹象，对可疑幼苗所生成的霉层进行镜检鉴定。
　　5. 烟丝检查：仔细挑选带有暗绿色或灰褐色病斑的烟丝碎片，在双筒解剖镜下检查，选取有霜霉层病斑的碎片，置于载玻片上，滴上2-3滴苯胺兰乳酚油，用解剖 针挑开铺平，加盖玻片，在酒精灯上离火焰几公分高缓缓加热煮沸，注意不要过火，以免液体喷出玻片外，并从盖玻片外补充苯胺兰乳酚油，保持不干。煮沸5——10分钟，待玻片冷却后，用吸水纸吸去多余液体即可镜检。叶片组织染成淡蓝色，卵孢子呈淡黄色至黄褐色，孢子囊和梗染成蓝色。如叶片透明度不够，还可重复加热煮沸，直至完全透明。如果需要检查的病叶较多，也可以在凹玻片上煮沸，待透明后再转到玻片上镜检。
　　检疫和防治
$ F4 I' Q3 W, ^9 R7 w, @　　1.1966年我国政府公布烟霜霉病为对外检疫对象，1990年又颁布法令，禁止从疫区进口烟叶及种子和有关易感植物，对因科研需要自疫区引进烟属植物幼苗的，应在指定的隔离检疫圃隔离试种，以严防此病传入。
; X" n0 R: t) D! L! b  Z0 Q2 S　　2.灭除病原。任何新区一旦发生烟霜霉病，应立即采取封锁病区，根除发病点的措施，除处理苗床或病田外，也要消灭病菌的各种越冬场所，包括消灭感病烟株病残体，观赏烟属和野生烟属植物，禁止病区温室栽培试验用的烟属植物。
6 C! F9 N- k& z9 M) @2 M9 V　　3.防治方法
　　1.药剂防治。瑞毒霉结合代森锰共同使用，由于瑞毒霉的内吸作用，可以延长药效期，取得增效的防治作用。防治烟草霜霉具有完全保护作用的药剂15种。
: p3 z$ e* S$ h, Z5 v# |　　2.抗病育种。栽培烟草品种间，虽然感病性存在着差异，但迄今未发现稳定的高抗品种，目前采取栽培烟与澳大利亚及南美的当地烟种，如与N.debneyi、 N.excelsior等进行种间杂交，获得较好的结果。
8 q5 T  z6 C9 G- U" u% X　　3.栽培防治。种子播种前消毒，加强苗床管理，对发病苗床应采用蒸气来菌，或用2%福尔马林进行土壤薰蒸，或更换新苗床，烧毁病株及残体；清除粉兰烟及野生烟，定期进行田间调查，发现病株及时拔除，消灭带病昆虫，防止人为携带等措施。