2012年报检员考试综合辅导：植物检疫性真菌常见检疫检验技术

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( D3 b1 [5 _* o# W" A* n7 s1 d　　2012年报检员考试辅导：重要考点归纳
7 q/ S1 X% K4 M- P# ^) N4 I　　直接检验法
　　适用范围：具明显症状的植物材料
　　主要工具：放大镜或解剖镜，主要是利用肉眼现场快速初检
　　染色检验法
' ?1 Z( T6 i' `! [　　原理：染病的组织，或病原菌本身，经特殊的化学药品处理后，可带有特殊的颜色
' [' l) n+ w' Z) G) _　　例如：马铃薯癌肿病（Synchytrium endobioticum）薯块上癌瘤不明显时，可做徒手切片，加1滴1%的“藏花红”染色液，健康组织细胞壁呈亮红色，感病组织细胞壁呈暗红色。
, d+ N' {& c3 a% ^/ o　　洗涤检验法
　　原理：种子表面常附着真菌孢子，将一定量的样品放入容器内，加一定量的无菌水，充分振荡，可使病菌孢子洗涤下来，而后离心后，可沉淀，镜检沉淀物可确定其种类和数量。
　　主要仪器和试剂：振荡器、离心机、显微镜、0.1%吐温溶液等
2 Q- C8 Y- x  J" b1 n" N　　主要试验流程如下：
# H: {" f  E" b5 V2 C1 j　　称取样品——洗脱孢子（振荡）——离心富集——镜检计数
　　影响检验结果的因素：
　　种子表面的病菌孢子不一定能完全洗涤下来；
　　离心管内，悬浮液表面常形成一层极难沉降的孢子薄膜，管壁上也可能黏附孢子；
# ^* v8 v( h( Y. Z7 D　　将悬浮液滴于玻片时，由于孢子迅速沉淀，造成一些视野间孢子分布极不均匀；
, ?( D* F. K% ?6 I$ N　　操作不够严格，造成人为误差。
　　保湿萌芽检验法
　　原理：种子携带的真菌，无论外表黏附的还是潜伏种子内的，在种子萌发阶段即可开始侵染，甚至有些在种子还未萌发时就可长出病菌。
　　主要仪器及试剂：吸水纸、沙土、冰箱、培养箱等。
　　主要包括：保湿培养检验、沙土萌芽和土内萌芽检验等三种方法，其中保湿培养检验法是国内外最常用的一种方法。
　　分离培养检验法
/ h4 |1 Q3 [( g* S: |) x　　常规植物病理学方法