4种自体神经移植方法修复周围神经缺损比较

会计考友

　　周围神经缺损采用自体神经移植均优于其他移植体，在临床上应用最为广泛，按移植神经的血供情况可分为传统的神经移植（CNG，即不吻合血管的神经移植）和吻合血管的神经移植（VNG）。对于瘢痕组织床上的长段神经移植，动物实验及临床效果VNG明显优于CNG，而在正常组织床上行神经移植时，带血管的游离神经移植与传统的神经移植相比有无明显优势尚有争议。McCullough，Shibata等的结果均表明：在正常基础上二种方法无明显差别。但是，Restrep，Koshima等的结果却表明：即使正常基床VNG仍优于CNG.按移植段吻合时放置的位置，可分为顺行放置吻合与逆行放置吻合，临床上均有应用，但二种方法对术后神经恢复效果是否有差异未见报道，也未见实验研究报道。故本实验研究设计：①顺行放置吻合与逆行放置吻合的比较；②带血管的游离神经移植与不带血管的游离神经移植的比较，为临床工作提供实验依据，提高对神经缺损的修复效果。
　　1　材料与方法
　　1.1　材料
　　1.1.1　实验动物　选用4～5个月龄新西兰兔78只，体重2～2.5kg，随机分组，以6只作为正常对照组，其余72只等分为A、B、C、D四组，每组18只，每只白兔双下肢均做同一种处理随后组间进行对比。A组：带血管蒂的顺行放置吻合；B组：带血管蒂的逆行放置吻合；C组：不带血管蒂的顺行放置吻合；D组：不带血管蒂的逆行放置吻合。
　　1.1.2　实验设备　①双人双目显微镜：XTS-6A，镇江光学仪器厂生产。②显微手术器械：宁波医疗器械厂生产。③常规手术器械。④日本OLYM-PUS光学显微镜。⑤日本NikonMicropphot-fax显微照相机。⑥高精度电子天平。⑦石蜡切片机：德国REICHERT-JUNG1165型回转式切片机。⑧DISA-1500型肌电图仪（Dantes，Denark）。⑨加拿大Matrox-Ip8伪彩色图像分析系统。⑩日立H-300透射电镜。
　　1.2　手术方法　采用25%乌拉坦（4ml/kg）静脉麻醉，手术区剪毛后常规消毒铺单，做大腿后部正中切口，于股二头肌和半腱肌、半膜肌的肌间隙分离显露坐骨神经。A组：避开供养坐骨神经的血管，在梨状肌出口下缘1cm处切断坐骨神经，在双人双目显微镜下用9-0无创缝合线原位施行神经外膜缝合，接着在其远侧距近侧吻合口1cm处再切断坐骨神经，亦缝合神经外膜。B组：根据该段坐骨神经滋养血管的情况，游离出一段包含滋养血管在内的组织蒂，切除1cm坐骨神经作为移植段，将移植段神经逆行放置，缝合神经外膜。C组：将移植段坐骨神经与周围组织完全游离顺行放置，缝合神经外膜。D组：将移植段坐骨神经与周围组织完全游离，逆行放置，缝合神经外膜。逐层缝合深筋膜及皮肤，无菌纱布包扎，石膏外固定。放回笼中喂养，定期取材。
　　1.3　观察指标
　　1.3.1　显微解剖观察　于术后4，医|学教育网搜集整理8，12周在手术显微镜下观察移植神经外观，吻合口粘连程度，有无神经瘤及瘢痕形成，神经远端有无变性及钳夹神经干后肢体的反应情况。
　　1.3.2　胫前肌称重　完整切除双侧胫前肌，高精度天平称重。
　　1.3.3　组织学观察　对神经进行取材，在近端、远端吻合口以远3mm，分别切取坐骨神经，做HE染色及锇酸髓鞘染色，光镜下观察，并进行轴突图像分析，每张切片拍4张不同视野、放大40倍的彩照，置于加拿大MATROX-Ip8伪彩色图像分析系统下进行分析。计算神经移植段及神经远端横截面轴突的数目及再生轴突的恢复率，恢复率计算方法是以对照组正常神经横切面轴突数为基数，与各时间组再生神经远端横断面轴突数目比较，得出各自的再生轴突恢复率，并对各组结果进行统计学分析。
　　1.3.4　电生理检查　术后12周测定神经传导速度、诱发电位波幅、潜伏期，使用DISA-1500型肌电诱发仪（DANTES，DENMARK），进行双侧动作电位（CMAP）检查，将刺激电极插到神经移植段以上，同心针记录电极插入胫前肌，刺激电极距离记录电极60.0mm，将地电极插入二者之间的肌肉中，给予电刺激，频率1Hz，时程0.1ms.当CMAP图形稳定，伪迹和动作电位起点清楚后，测量记录潜伏期（LAT）、波幅（AMP）及神经传导速度（CV）。打印图形及有关数据。