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[操作指导] 外周血造血干细胞单采

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发表于 2012-8-21 11:36:35 | 显示全部楼层 |阅读模式
  方法及内容  外周血造血干细胞(PBSC)是存在于外周循环血液中的一种具有自我更新、分裂增殖和分化功能的细胞,正常成人PBSC占外周血液单个核细胞的1‰左右,经适当动员处理可提高至10‰。PBSC的比重在1.058~1.060,直径为6~7μm.  [PBSC分类]  1.自身PBSC即取自患者自身,单采后保存待自身PBSC移植时使用。  2.同种异体取自正常成人或与患者有血缘关系的健康亲属。单采后可用于同种异体PBSC移植。  [PBSC的动员]  1.动员方法分类  (1)化学药物动员:造血干细胞动员剂应具备以下几个条件:①动员效果好,提高外周血中造血干细胞倍数高,动员的造血干细胞有重建造血功能;②不良反应小;③动员作用应持续时间长,便于用血细胞分离器分离外周血造血干细胞。  造血干细胞动员剂一般分为3种类型:①肿瘤化疗药物,如环磷酰胺、马利兰、柔红霉素、阿糖胞苷等。这些药物只适用于恶性病人。②正常人和病人都可采用的药物,如硫酸葡聚糖等聚阴离子制剂属于这种造血干细胞动员剂,其效果好,动员作用持续时间长。③各种重组的人造血细胞刺激因子(重组细胞集落刺激因子),如G-CSF、M-CSF、GM-CSF、IL-3、IL-6和SCF等,其不良反应小,动员效果好。  (2)辐射动员。放射线既能直接杀灭肿瘤细胞,同时也使正常造血细胞受到伤害,引起反馈性的造血增生,外周血中造血干细胞数量随着增加。这种动员方法适用于血液病、某些恶性肿瘤转移患者。  2.动员方法  (1)正常人的动员:  ①这类人员主要有作为同种异体PBSC移植的供体,或作为以后有可能需要进行自体PBSC移植的正常人,如从事辐射工作人员、宗教信仰(拒绝异体外周血造血干细胞移埴)。这类人员以用药物动员为佳,动员剂主要为重组细胞集落刺激因子。  ②方法:于PBSC单采前5d,皮下注射重组细胞集落刺激因子,如G-CSF2.5~5.0μg/(kg.d),1/d,采集当天皮下注射较高剂量重组细胞集落刺激因子(如G-CSF5μg/kg),并静脉推注地塞米松10mg.一般情况下,单采前(使用地塞米松前)须计数外周血中白细胞总数及分类,若白细胞总数未达到20×109/L,则应延长动员时间,并适当增加动员剂的剂量,直至白细胞总数达20×109/L.第1次单采后计数单个核细胞数及测定CD+34细胞百分率计算是否达到移植剂量,若低于移植剂量,须进行第2、第3次单采,此时亦要继续使用动员剂,总采集数必须超过移植剂量,若能达到2倍移植剂量更佳。  (2)患者的动员:①对象:拟行自身PB-SC移植的患者。②方法:动员的方案有:化疗药物+重组细胞集落刺激因子、全身照射+重组细胞集落刺激因子和化疗药物+全身照射+重组细胞集落刺激因子。患者动员4d后监测白细胞数,若白细胞计数达1×109/L和血小板达20×109/L后,开始单采外周血造血干细胞,单采当天仍需使用重组细胞集落刺激因子和静脉推注地塞米松10mg.一般需单采5-7次,每次均须计数单个核细胞总数和测定CD+34细胞百分率,当达到移植剂量时停止单采。  [单采操作]  1.前提经过PBSC的动员,供体或患者的白细胞总数和血小板计数达到要求后,可在静脉推注地塞米松10mg后1~2h开始单采。  2.单采器材准备同血小板单采。  3.单采操作(1)同血小板单采。(2)全血处理量一般为8-15L。  注意事项  1.单采过程中严密监测献血员/患者生命体征。  2.单采过程中严密注意献血员/患者对抗凝剂的反应,若出现异常反应,应迅速处理。  3.严格无菌操作,预防感染及单采成分被污染。  4.单采前应向献血员/患者或家属说明单采的目的、过程及可能出现的不良反应及意外,并要求其签字。  5.每次单采应有详细的记录,并注意保存。
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