2011微生物与寄生虫检验知识辅导：自临床标本中直接检查抗原

会计考友

　深部真菌感染者血中难于培养出菌体，尤其是丝状真菌菌体常粘附、缠绕于组织，血中不易出现。但组织中菌体可溶性抗原可吸收入血自血、尿或感染组织液中直接检查真菌抗原为快速诊断的重要手段；虽也可检查抗体，但难达快速诊断。
　　检测念球菌属的甘露聚糖及其抗原。
　　1．胶乳凝集试验（Sanofi Diagnostics Pasteur公司）
　　取300μl血清，加100μlEDTA处理液，混匀，煮沸3min，离心10000×g10min，取上清40μl加10μlSanofi胶乳粒子，3min内出现凝集为阳性。
　　2． EIA法。以单抗包被酶标板，用双抗体夹心法检查血清中念球菌抗原（Behring Diagrostics公司试剂）
　　3．检测血中的白色念球菌的甘露聚糖抗体。ENA法检查中甘露聚糖对念珠菌感染的诊断敏感性40%，特异性98%，ENA法检查甘露聚糖抗体对念珠菌感染的诊断敏感性53%,特异性94%。
　　4．检查血清中D-阿拉醇或D-阿拉伯醇与L-阿拉伯醇的比值可快速诊断念珠菌病。Yeo等用基因重组的D-阿拉伯醇脱氢酶以酶荧光法定量，发现念珠菌感染者血清中来自菌体的D-阿拉伯醇明显升高，用此法迅速论断新生儿的侵袭性念珠菌病。
　　Mitsutake等比较了自39名深部念珠菌病患者血液中检出抗原的四种方法。应用斑点印迹法检查其烯醇化酶（Enlase）抗原的阳性率71.8%，特异性100%；应用胶乳凝集检查热敏性糖蛋白抗原阳性率76.9%，特异性87.5%；应用胶乳凝集检查甘聚糖抗原阳性率75.6%，特异性100%，应用鲎试试验检查细胞壁组分β-Glucan的阳性率84.4%，特异性87.5%。