生化检验辅导：胰蛋白酶的测定

会计考友

　　胰蛋白酶是胰腺分泌的重要消化酶之一，人类胰腺细胞合成两种主要的胰蛋白酶，通常是以无活性的酶原形式存在，即胰蛋白酶原-1和胰蛋白酶原-2，它们都储存在酶原颗粒中，在食道神经反射和／或肠道激素（胆囊收缩肽-肠促胰酶素）的刺激下分泌入肠道，肠液中的肠肽酶可以激活胰蛋白酶，胰蛋白酶本身及组织液亦可使其激活，亦可被Ca2+、Mg2+等离子激活。
　　两种胰蛋白酶酶原的电泳迁移率不同，最适pH亦有差别，两者很少有免疫交叉反应，因此有可能用免疫方法测定。
　　1.血清胰蛋白酶：虽然胰液中含有大量的胰蛋白酶，正常时却很少进入血循环，健康人血清中存在的主要为游离胰蛋白酶原-l，没有游离的胰蛋白酶。
　　急性胰腺炎时，血清胰蛋白酶和淀粉酶平行升高，其峰值可达参考值上限的2～400倍，两种胰蛋白酶的分布和急性胰腺炎的类型及严重程度有关。轻型者80%～99%为游离胰蛋白酶原-1及极少的结合型的胰蛋白酶-1；而重型者游离胰蛋白酶原-1可低到胰蛋白酶总量的30%，大部分以结合形式存在，它可以和α1-抗胰蛋白酶或α2-巨球蛋白结合。
　　由于有上面所说的临床意义，许多人都想把血清胰蛋白酶测定用于胰腺疾病诊断，但因为血清中还有其他蛋白酶也能水解试剂中的底物，同时还有蛋白酶的抑制物存在，这些都会影响测定结果，所以以前临床很少测定血清胰蛋白酶。但现在已经有了测定胰蛋白酶原-1、胰蛋白酶-1、胰蛋白酶-1：α1-抗胰蛋白酶复合物的免疫方法，不过目前还没有广泛用于临床。其临床意义和价值尚需观察和总结。
　　2.尿胰蛋白酶：由于胰蛋白酶原的分子量比较小（25kd），所以很容易由肾小球滤出，但是肾小管对两者的回吸收却不同，对胰蛋白酶原-2的回吸收低于胰蛋白酶原-1，因此，尿中前者的浓度较大。在急性胰腺炎时尿中胰蛋白酶原-2的浓度明显升高。
　　有研究报道急性胰腺炎时尿胰蛋白酶原-2的特异性为95%，敏感性为94%，说明其优于淀粉酶，是一个比较敏感而特异的诊断指标，而被用做在急诊时的筛选试验。尿胰蛋白酶原-2阴性结果多半可以除外急性胰腺炎，而阳性结果时应做进一步检查以确定诊断，也应做动态观察。
　　现用的尿胰蛋白酶原-2的试纸条定性方法是基于免疫层析的原理。试纸条上有两种抗人胰蛋白酶原-2抗体，一种标记于蓝色乳胶颗粒上，作为检测标记物，另一种固定在膜上，以捕捉标记的颗粒，显示阳性结果。按要求将试纸条的一部分浸入尿液，如果出现蓝色条带是为阳性。试验可以在床旁进行，于5分钟内完成，适合急诊应用。胰蛋白酶原-2还可用免疫荧光法作定量检测。
　　急性胰腺炎的诊断要从两个方面考虑，即临床症状（急性腹痛等）和实验室检查（各项检查的临床意义已写在各试验中），但两者都有不典型的时候，应注意鉴别诊断。