生化检验辅导：胆汁酸测定的方法学评价

会计考友

　　血清总胆汁酸的测定是肝疾病的一个敏感指标。目前推荐检测血清总胆汁酸的方法是循环酶法。酶学偶联测定方法第三代试剂原理，是血清中总胆汁酸在NAD+存在下，3α-HSD作用于3-α羟基生成中间产物3-酮类固醇，NAD+被还原为NADH。在黄素酶的存在下，NADH氧化为NAD+，而共存的NBT还原为甲潜衍生物。甲潜衍生物的生成量与血清中总胆汁酸含量成正比。第四、五代试剂原理，胆汁酸被3α羟基类固醇脱氢酶（3a-HSDH）及口-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型特异性的氧化，生成3酮类固醇及}硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型。此外，生成的3酮类固醇在3α羟基类固醇脱氢酶及β硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型存在下，生成胆汁酸及β烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型。以上依据循环酶而放大量的胆汁酸测定生成的β-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型的吸光度，计算血清中胆汁酸的量。第五代循环酶法有将血清中胆汁酸浓度放大的效果。
　　参考值：