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[考试试题] 生化检验辅导:淀粉酶测定(AMY)

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发表于 2012-8-22 23:02:49 | 显示全部楼层 |阅读模式
  淀粉酶包括唾液淀粉酶和胰淀粉酶,Cl-是该酶的激活剂 。
  (一)方法
  (1)碘一淀粉比色法测定:B血清(或血浆)中a一淀粉酶(a-AMY)催化淀粉分子中α-1,4糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1,6糖苷支链的糊精。在底物过量的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物,其蓝色的深浅与空白管比较、从而推算出淀粉酶的活性单位。
  (2)对一硝基苯麦芽七糖苷法:以对-硝基苯麦芽七糖苷为底物,经α-淀粉酶催化,水解为游离的寡糖(G5、G4、G3)及葡萄糖单位减少的对一硝基苯寡糖苷(4NP—G2、4NP-G3、4NP-G2);4NP-G2、4NP-G3及一部分4NP-G4,受α-葡萄糖苷酶催化,水解为对一硝基酚和葡萄糖。对一硝基酚的生成量,在一定范围内与R-淀粉酶活力成正比;但其摩尔数仅为酶解底物(4NP-G7)的三分之一,还有三分之二结合在4NP-G4中。
  PNP(对一硝基苯酚)的生成引起405nm处吸光度的上升,上升速率与AMY的活力成正比。
  (3)2-氯一4一硝基苯麦芽三糖苷法
  CNP(2一氯一4一硝基苯酚)的生成引起405nm处吸光度的上升,上升速率与AMY的活力成正比。
  (二)生理变异
  成年人血中AMY与性别、年龄、进食关系不大,新生儿AMY缺乏。满月后才出现此酶,逐步升高,约在5岁时达到成人水平,老年人AMY开始下降,约低25%。
  (三)参考值
  碘一淀粉比色法:血清80~l80U/L;尿液100~1200U/L
  对一硝基苯麦芽七糖苷法:血清淀粉酶220 U/L(37℃)
  尿淀粉酶1200U/L(37℃)
  (四)临床意义
  淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌,可通过肾小球滤过。
  1.升高:
  (1)急性胰腺炎:血和尿中的AMY显著增高。发病后8~12h血清AMY开始增高,12~24h达高峰,2~5天下降至正常。尿AMY约于发病后12~24h开始升高,下降比血清AMS慢,因此,在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。特别是急性胰腺炎时。
  碘一淀粉比色法结果如超过500U有意义,达350U时应怀疑此病。
  (2)流行性腮腺炎
  (3)急性阑尾炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后等均可见血清AMY增高,但常低于500U。
  2.降低:
  正常人血清中AMY主要由肝脏产生,故血清与尿中AMY同时减低主要见于肝炎、肝硬化、肝癌及急性和慢性胆囊炎等。
  肾功能障碍时,血清AMY也可降低。
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