2013血液检验复习指导：血细胞计数与分类研究

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1.红细胞的计数、分类及其功能的研究
（1）循环的红细胞总量的测定：
生物素—逆转抗生物素蛋白—FITC系统的特异性和流式细胞仪（FCM）的敏感性结合起来，建立了FCM测定人红细胞总量的方法，此方法具有标本用量少，无放射性的优点，适用于儿童和孕妇测定循环红细胞总量。
（2）网织红细胞总数：
外周血网织红细胞计数（百分数和绝对值）是一反映骨髓红系增生活性的常用指标。许多学者先后提出应用FCM和不同的RNA特异性荧光染料自动计数网织红细胞的方法，如派若宁Y、AO、溴化乙啶、thiazoleorange等。
目前最普遍应用的是thiazoieorange染色法，这种特异性RNA的激发波（488nm）测量的特点，与人工计数法相比，它不但能得到网织红细胞的百分数和绝对值，而且还能获得网织红细胞成熟指数（RMI）。RMI是一个检测骨髓功能的独立实验室指标，它与网织红细胞内RNA含量成正比，RMI可成功地用于评价骨髓移植的效果。
目前，FCM检测网织红细胞主要用于
1）预测骨髓移植的效果；
2）解释各种红系增长低下性贫血的发病原因；
3）评价某些新的重组生物制剂的治疗效果。
2.白细胞计数、分类及其功能的研究
（1）白细胞计数和分类
FCM方法避免常规染色过程中，由于细胞漂洗和分类溶解所致的人工假象，提供了可靠的评价血液状态的第一手资料，并进一步筛选细胞亚群、测定其他参数。LDS-751、CD45、thiazoleorange
（2）中性粒细胞的功能
FCM可在单个细胞水平上定量测定中性粒细胞的功能变化，有助于了解白细胞在感染性疾病、自身免疫性疾病、恶性疾病的作用和诊断意义。
（3）血小板功能的研究：
FCM可检测血小板膜抗原，如CD41a、CD42b、CD36、CD62p、CD63等。应用流式细胞术检测这些单克隆抗体的变化可用于：
a、评价血小板功能状态；
b、探测循环血液中激活的血小板；
c、探测血小板自身抗体。
如对原发性血小板减少性紫癜、慢粒急变和再障病人的血小板自身抗体的检测中发现，病人均可探测到IgM型自身抗体，有的病人可同时伴有IgM或IgA自身抗体，后者血小板减少更明显。因此，IgG血小板免疫荧光检查是检测自身免疫反应的敏感和特异指标，它可直接测定自身免疫性血小板减少病人的血小板表面免疫球蛋白，进行血小板交叉配型，以此为有自身免疫反应的病人选择合适的供血者。