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[免疫检验] 免疫检验考试辅导:碱性磷酸酶的概述

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发表于 2012-8-22 23:33:40 | 显示全部楼层 |阅读模式
  碱性磷酸酶(AP):是从牛肠粘膜或大肠杆菌中提取。从大肠杆菌提取的AP分子量为80kD,酶作用的最适pH为8.0;用小牛肠黏膜提取的AP分子量为l00kD,最适pH为9.6.一般采用对硝基苯磷酸酯(p-NPP)作为底物。它可制成片状试剂,使用方便。产物为黄色的对硝基酚,在405nm有吸收峰。用NaOH终止酶反应后,黄色可稳定一段时间。
  在ELISA中应用AP系统,其敏感性一般高于应用HRP系统,空白值也较低。但由于AP较难得到高纯度制剂,稳定性较HRP低,价格较HRP高,制备酶结合物时得率较HRP低等原因,国内在ELISA中一般均采用HRP.
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