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[免疫检验] 免疫检验考试辅导:速率散射比浊分析简介

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发表于 2012-8-22 23:34:21 | 显示全部楼层 |阅读模式
  (一)基本原理
  速率散射比浊分析是一种动力学测定方法,在一定条件下,抗原和相应的抗体很快结合成抗原抗体免疫复合物颗粒,速率比浊法就是在一定时间内抗原抗体结合过程中,测定二者结合的最大反应速度,即反应达顶峰峰值。所谓速率是抗原抗体结合反应过程中,在单位时间内两者结合的速度。速率法是测定最大反应速率,即在抗原抗体反应达最高峰时,通常为数十秒钟,测定其复合物形成的量。峰值的高低在抗体过量情况下与抗原的量成正比。峰值出现的时间与抗体的浓度及其亲和力直接相关。不同抗原含量其速率峰值不同,通过电脑处理,求出抗原含量。
  (二)抗原过量检测
  真正的抗原过量检测是为保证速率散射比浊分析检测的准确性和精确度,在Beckman公司的生产的ARRY360系统中,设计有抗原过量检测系统。其原理是根据抗原抗体反应形成的浊度不断增加而设计的。在抗体固定的情况下,免疫复合物的生成量随抗原的增加而增加,当抗原量超过抗体量时,免疫复合物的量反而减少。根据这一原理,当标本中的抗原和反应液中的抗体结合后,若反应液中有未结合的抗体存在,再加入抗原时,可见新的速率峰值信号。如果没有游离的抗体存在,即抗原过剩的情况下,就不会有或者只有很小的新的速率信号出现,仪器会重新对标本进行更高稀释(1:6、1:36、1:216及1:1296等),然后进行测定,使结果准确可靠。
  附:终点散射比浊法
  其原理是让抗原抗体作用一定时间,使其反应达到平衡后,测定其复合物的量。复合物的浊度不再受时间的影响,但反应复合物聚合产生絮状沉淀之前(大约反应数十分钟)进行浊度测定。敏感度达mg/L水平,可自动化,但反应时间较长。
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