免疫检验考试辅导：外周血单个核细胞分离的原理的试剂

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　　外周血单个核细胞分离的原理的试剂：常用的分层液有Ficoll与Percoll两种。
　　Ficoll分层液法：
　　Ficoll分层液即聚蔗糖-泛影葡胺，是一种较理想的细胞分层液，其主要成分是一种合成的蔗糖聚合物，具有高密度、低渗透压、无毒性的特点。
　　主要用于分离外周血中单个核细胞，是一种单次密度梯度离心分离法。
　　操作时，将分层液置于试管下层，然后将肝素化的全血或白细胞悬液以Hanks或PBS液稀释后，轻轻铺于分层液面上，经2000rpm15-20min离心后，红细胞与粒细胞因比重大于分层液，故较快沉于管底。血小板则比重小于分层液而悬浮于血浆中。唯有与分层液比重相当的单核细胞和淋巴细胞密集于血浆层和分层液的界面中。其分布由上到下依次为：稀释的血浆层，单个核细胞层，粒细胞层和红细胞层。
　　（2）Percoll分层液法：
　　Percoll是一种经聚乙烯吡咯烷酮（PVP）处理的硅胶颗粒，对细胞无毒性。利用Percoll液经高速离心后可形成一个连续密度梯度的原理，将比重不等的细胞分离纯化。其分布由上至下依次为：死细胞组分及血小板分层，富含单核细胞组分层，富含淋巴细胞组分层及红细胞与粒细胞组分层.