临床检验技师生化检验精华辅导：离心技术种类及在检验中的应用

会计考友

　　离心技术在生化检验中的应用主要有两方面：
　　①对悬浮液中颗粒的分离，如从全血中分离血清、血浆等；
　　②分离两种密度不同液相，如从有机溶剂和水的混合物中分离出有机相等。
　　1.普通离心法：可用来分离细胞、细胞膜或细胞碎片。
　　2.差速离心法：又称差级离心法，其原理是交替使用低速或高速离心，也可采用逐渐增加离心速度的办法，通过不断增加相对离心力使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分部沉淀。由于分辨率不高，常用于定性分离手段之前的粗制品提取。
　　3.密度梯度离心法：比差速离心法复杂，但该法具有很高的分辨率，可以同时使样品中的各个组分得到分离。其做法是将样品放在密度梯度介质中进行离心。可分为：
　　1）速率区带离心法：
　　根据分离的粒子在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内分成一系列区带，达到彼此分离的目的。离心前在离心管内装入密度梯度介质（如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等），待分离的样品铺在梯度液的顶部、离心管底部或梯度层中间，同梯度液一起离心。离心后在近旋转轴处的介质密度最小，离旋转轴最远处介质的密度最大。一般用于分离大小相异而密度相同的物质。
　　2）等密度区带离心法：
　　离心前预先配制介质的密度梯度，待分离的样品铺在梯度液顶部或与梯度液混合，当梯度液由于离心力作用逐渐形成低浓度而管顶稀的密度梯度，同时，原来分布均匀的粒子也发生重新分布。当管底介质的密度大于粒子的密度时，粒子上浮。此法常用于分离大小相似而密度差异较大的物质。
　　4.分析性超速离心
　　主要是为了研究生物大分子的沉降特性和结构，如测定大分子的相对分子量、生物大分子的纯度估计、分析生物大分子中的构象变化等。