2011年执业药师综合辅导：胰岛素生物检定法

会计考友

　　胰岛素生物检定法系比较胰岛素标准品（S）与供试品（T）引起小鼠血糖下降的作用，以测定供试品的效价。
　　标准品溶液的配制
　　精密称取胰岛素标准品适量，按标示效价，加入每100ml中含有苯酚0.2g并用盐酸调节pH值为2.5的0.9%氯化钠溶液， 使溶解成每1ml中含20单位的溶液，分装于适宜的容器内，4～8℃贮存，如无沉淀析出，可在3个月内使用。
　　标准品稀释液的配制
　　试验当日，精密量取标准品溶液适量，按高低剂量组（ds、ds）加0.9%氯化钠溶液（pH2.5）配成两种浓度的稀释液，高低剂量的比值（r）不得大于1：0.5.高浓度稀释液一般可配成每1ml中含0.06～0.12单位，调节剂量使低剂量能引起血糖明显下降，高剂量不致引起血糖过度降低，高低剂量间引起的血糖下降有明显差别。
　　供试品溶液与稀释液的配制
　　按供试品的标示量或估计效价（A），照标准品溶液与其稀释液的配制法配成高、低两种浓度的稀释液，其比值（r）应与标准品相等，供试品和标准品高低剂量所致的反应平均值应相近。
　　检定法
　　取健康无伤、同一来源、同一性别、出生日期相近的成年小鼠，体重相差不得超过3g，按体重随机分成4组，每组不少于10只，逐只编号， 各组小鼠分别自皮下注入一种浓度的标准品或供试品稀释液，每鼠0.2～0.3ml，但各鼠的注射体积（ml）应相等。注射后40分钟，按给药顺序分别自眼静脉丛采血，用适宜的方法，如葡萄糖氧化酶－过氧化酶法测定血糖值。第一次给药后间隔至少3小时，按双交叉设计，对每组的各鼠进行第二次给药，并测定给药后40分钟的血糖值。照生物检定统计法中量反应平行线测定双交叉设计法计算效价及实验误差。
　　本法的可信限率（FL%）不得大于25%.